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楼主: waterbingp

[仪器维护] 流式日常维护

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发表于 2011-4-12 17:40:16 | 显示全部楼层
回复 waterbingp 的帖子

买鞘液最好还是买BD公司的吧,国内应该有BD Biosciences的代理点的吧。。。
你们的FACS机器是什么型号的啊
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发表于 2011-4-12 21:27:08 | 显示全部楼层
鞘液可以用双蒸水代替,我们也用血常规仪器用的鞘液(一般医院都会有的,国产的就可以),用PBS的话会有很多结晶,接触PBS的金属部分也易生锈,仪器要彻底冲洗维护。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2011-4-21 16:57:51 | 显示全部楼层
LZ什么机器?
如果只是检测,不要用PBS作鞘液,用去离子水即可
PBS干了会结晶。
鞘液用水的话,基本不用特殊保养,用完清洗管路即可
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发表于 2011-4-26 08:47:54 | 显示全部楼层
关于鞘液,按楼上的意见,总结一下:
1、选择BD公司的鞘液;
2、没有BD的,用其他公司的鞘液也可以;
3、不用鞘液用PBS也可以,但使用PBS会有结晶产生、会腐蚀金属;
4、使用双蒸水或去离子水亦可。
我有疑问:鞘液的成分是什么?有配方吗?如果鞘液可用双蒸水或去离子水、PBS等代替,为什么BD还专门做鞘液卖?
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发表于 2011-4-26 13:46:54 | 显示全部楼层

似乎属于商业机密,目前国产或自配的可以用这些东西:泊洛沙姆、聚山梨酯-80、十二烷基硫酸钠、三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、Tris碱。我觉得用鞘液和双蒸水各有利弊吧。
用鞘液可能比较贵,但这些商业公司肯定在成份上进行了优化,所以对机器管道的影响肯定非常小;而用双蒸水虽然比较便宜,而且也没有盐份,但是我们需要注意到,某些吸附性强的物质(如PI等)或蛋白质就容易沉淀在管路中,对于冲洗时就特别需要注意,切记要冲洗彻底。PBS就象楼上很多朋友们讨论的那样,容易产生盐份的沉积,也是对冲洗要求很高。

配方可见下面这篇文章:




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发表于 2011-4-26 17:26:52 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2011-4-26 13:46
似乎属于商业机密,目前国产或自配的可以用这些东西:泊洛沙姆、聚山梨酯-80、十二烷基硫酸钠、三羟甲基 ...

我想对鞘液的要求可能有两方面:一是形成稳定的液流,保证流式操作的需要;二是能较好的清洗管道,对管道不造成不利影响。前者应该更重要。
但从大家的实际应用来看,既然能用PBS、双蒸水、去离子水,那说明实验结果还是比较稳定的。缺点就是对管道的损害了。
这篇文章的作者很有想法啊
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 楼主| 发表于 2011-5-25 18:13:40 | 显示全部楼层
回复 hnlydyg 的帖子

我们实验室用的BD FACScalibur。刚开始,困难重重
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发表于 2011-5-25 19:50:48 | 显示全部楼层
waterbingp 发表于 2011-5-25 18:13
回复 hnlydyg 的帖子

我们实验室用的BD FACScalibur。刚开始,困难重重

什么困难?说出来交流交流:)
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发表于 2011-5-26 20:47:01 | 显示全部楼层
回复 waterbingp 的帖子

是啊,说出来交流交流,这个机器挺好使的
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 楼主| 发表于 2011-5-31 10:30:41 | 显示全部楼层
回复 niwanmao 的帖子

就关于鞘液我纠结了好久。我用自己配的PBS,然后0.22微米过滤,过滤的速度很慢。我都过滤了两个星期差不多不到2L,然后用了两次就没了,然后还要等两个星期。我这实验真是没法进行了。今天早上问了问BD的鞘液,20L=848元,价钱还是有些贵呀,老板肯定不会花这一部分钱的,所以我准备按照大家的说法,用双蒸水做鞘液了。还有什么要注意的地方,希望能给指出。
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