FC Block和抗体可以一起混合后染色吗？

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-3-4 21:15
倪老师，请教下，如果是全血样本，在哪一步使用Fc受体封闭？因为全血样本通常是先表染，再裂红，而Fc受体 ...

抗体染色之前。

wmj123456

那也就是说，如果检测的样本需要封闭，是拿到血液样本后，先进行Fc受体封闭，然后表染，再裂红了。像CD14,CD16,CD56,cd19这些指标分群的比较明显，检测单核，B和NK时，可以不进行Fc受体封闭了吧？

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-3-5 21:37
那也就是说，如果检测的样本需要封闭，是拿到血液样本后，先进行Fc受体封闭，然后表染，再裂红了。像CD14,C ...

是的

Yuck

我一直用的是Biolegend的。封闭的话一般流程是封闭完洗涤孵抗体。二般流程是封闭完不用洗涤直接加抗体。说明书都说可以。我们对比了没啥问题。选择的方式是封闭完，直接加抗体孵育。

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-3-6 07:44
是的

好的，谢谢倪老师的耐心回答

飞翔

niwanmao 发表于 2021-3-9 19:38
需先进行Fc Block之后，洗涤，再进行抗体染色。

这个我看说明书都是Fc Block提前加5-10min，不洗直接加抗体染色，应该没区别吧

niwanmao

飞翔 发表于 2023-3-10 20:44
这个我看说明书都是Fc Block提前加5-10min，不洗直接加抗体染色，应该没区别吧 ...

可能有些说明书是会这样说的，从原理上讲，我个人倾向于先孵育后，再洗涤。国外有些大学的流式中心Protocol也是提示洗涤。
主要看结果是否影响吧。

大品咿呀哟

先封闭 然后洗一次再染 要用封闭就都封闭要是不用就都不用就好了，国产的和进口的效率我们之前做过类似的预实验 是存在差别但是我个人觉得不是太重要 后面就不用了