BV421与BV786有光谱重叠能否共用

Veblen

liuruiluna 发表于 2022-4-1 14:59
此外，可能要看把这两种荧光素用在了什么表达关系的marker上，如果是毫不相关的两个marker，影响会小一些  ...

感觉越来越迷糊了，既然上面能说调得开，现在却要看两个marker的关系了，岂不是说有包含关系的不太适合用？

liuruiluna

Veblen 发表于 2022-4-4 22:18
感觉越来越迷糊了，既然上面能说调得开，现在却要看两个marker的关系了，岂不是说有包含关系的不太适合用 ...

就是说，两个荧光素有光谱重叠，但是用的时候注意放在不同的细胞类型上，影响会小一些。倪老师那个意思我猜是说虽然他们有重叠，但是补偿还是能够调开的，与我说的情况不矛盾哈

半年y

Veblen 发表于 2022-4-4 22:17
原理不一样，APC-Cy7是串联荧光素。

emmm，我意思是从他们的光谱看上去，都会有两个峰

hezeljgouc

Veblen 发表于 2022-4-4 22:18
感觉越来越迷糊了，既然上面能说调得开，现在却要看两个marker的关系了，岂不是说有包含关系的不太适合用 ...

这两个就是和APC跟APC-Cy7一样。BD官网就有详细的说明。
BD Horizon Brilliant™ Violet 421 (BV421) (Ex-Max 407 nm/Em-Max 421 nm) is a polymer-based dye excited by the violet laser and is one of the brightest fluorochromes offered by BD Biosciences.
BD Horizon Brilliant™ Violet 786 (BV786) (Ex-max 407 nm/Em-max 786 nm) is a tandem fluorochrome of BD Horizon BV421 and an acceptor dye with an Em Max at 786 nm.
实际上BV605， BV650，BV711和BV786都是以BV421为核心基团的串联染料，只不过他们的名字让人误以为是单体染料。

Veblen

liuruiluna 发表于 2022-4-8 16:40
就是说，两个荧光素有光谱重叠，但是用的时候注意放在不同的细胞类型上，影响会小一些。倪老师那个意思我 ...

同意你的说的，我也是这么理解的

niwanmao

Veblen 发表于 2022-4-13 00:40
同意你的说的，我也是这么理解的

不是的，如@hezeljgouc  站友所说，BV785是串联染料，你看到该染料和BV421重叠的峰，应该是中间进行能量转移的那部分，在光谱图上是显示给你看的，但实际上染料激发时，这部分光能是直接转移给串联的染料的，不会或极少释放出来的。

sdusdl1

Veblen 发表于 2022-4-4 22:17
原理不一样，APC-Cy7是串联荧光素。

其实BV786也是串联的吧，要不然怎么会有一个发射峰和BV421一致呢，我认为BV421和BV786的关系基本上与PE和PE-Fire640一样

sdusdl1

niwanmao 发表于 2022-4-13 07:49
不是的，如@hezeljgouc  站友所说，BV785是串联染料，你看到该染料和BV421重叠的峰，应该是中间进行能量转 ...

倪老师说得对，Biolegend官网上给的光谱流式做出来的BV785的发射光谱几乎只有一个峰，我也见到过出现两个峰的BV系列染料，那基本上是染料保存不当导致串联荧光素发生了断裂，正常情况下补偿很小的。

Veblen

sdusdl1 发表于 2022-4-16 17:28
倪老师说得对，Biolegend官网上给的光谱流式做出来的BV785的发射光谱几乎只有一个峰，我也见到过出现两个 ...

懂了，正常情况下，串联染料第一个峰又作为了第二个峰的激发光，所以实际检测过程中不应该出现两个峰。

Veblen

niwanmao 发表于 2022-4-13 07:49
不是的，如@hezeljgouc  站友所说，BV785是串联染料，你看到该染料和BV421重叠的峰，应该是中间进行能量转 ...

明白了，谢谢倪老师