教你分选胰岛α、β细胞

niwanmao

做内分泌研究的朋友应该知道可以用HPa3和HPi2来分选胰岛α细胞和β细胞，以进一步进行实验研究，然而，分选步骤涉及到的细胞制备、分选喷嘴的选择、设门的细节等，可能一般人都还不知道。
流式中文网在此转来Youtube一个精彩的技术型 视频，为您详细呈现胰岛α、β细胞分选的各个细节性protocol，让您看了之后，马上就能上手。

视频截图及说明：
1、流式细胞术的细胞标本制备（供分选用）：


2、续上图，流式细胞术的细胞标本制备（供分选用）：


3、流式分选仪的参数选择（包括喷嘴和分选PBS以及仪器设置）：


4、FSC/SSC散点图的图形设置方法，胰岛细胞的SSC比造血细胞小：


5、注意区分粘连体，并且要注意宁可圈小，否则容易混进与α、β细胞粘连的其它细胞



6、死活染料，这是非常重要，无论是分选还是分析都一样：


7、分选β细胞，首先要圈中HPa3阴性的细胞


8、其次再选中HPi2阳性的细胞，即为β细胞，图中两种圈法均可


9、分选α细胞，门也不能圈地太大，否则容易不纯




视频免费欣赏：

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siyubai1008

niwanmao 发表于 2017-3-30 10:16
可以的！

这两个抗体我去ALPCO官网上查了一下 没有找到 还有其他公司有卖这两个抗体的吗？

niwanmao

culturelily 发表于 2015-6-3 12:40
最后一张图的补偿都没调吧

PE和APC之间没有补偿：）

culturelily

最后一张图的补偿都没调吧

hellenli

倪老师，我想咨询一下，这两个抗体在哪里可以买到，我看几个大的抗体公司都没有的

niwanmao

hellenli 发表于 2015-12-9 12:17
倪老师，我想咨询一下，这两个抗体在哪里可以买到，我看几个大的抗体公司都没有的 ...

ALPCO公司有：
http://w.alpco.com/default.aspx?a=psearch&s=HPa3
http://w.alpco.com/default.aspx?a=psearch&s=HPi2

hellenli

niwanmao 发表于 2015-12-9 19:35
ALPCO公司有：
http://w.alpco.com/default.aspx?a=psearch&s=HPa3
http://w.alpco.com/default.aspx?a=p ...

谢谢倪老师，之前都不晓得这个公司

siyubai1008

倪老师 你好 这两个标记物是用来区分鼠的胰岛细胞还是区分人的也可以用？如果不做分选而只做分析 这两个标记物是不是也是可用的呢？

niwanmao

siyubai1008 发表于 2017-3-30 09:13
倪老师 你好 这两个标记物是用来区分鼠的胰岛细胞还是区分人的也可以用？如果不做分选而只做分析 这两个标 ...

可以的！

gxyliu

siyubai1008 发表于 2017-3-31 13:22
这两个抗体我去ALPCO官网上查了一下 没有找到 还有其他公司有卖这两个抗体的吗？ ...

您买到这两个抗体了？