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[图片] Kaluza雷达图妙用,一张图分析多个淋巴细胞亚群!

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发表于 2013-6-26 19:14:20 | 显示全部楼层 |阅读模式

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昨天给大家演示了一下雷达图做信号转导时的用途。其实以前自己也没怎么用过。今天拿它来捣鼓了一下多色的淋巴细胞亚群结果,有了新的发现,原来使用雷达图可以在一张图片上直接分析多个细胞亚群,比我们用多张图还方便,现在跟大家一起分享一下。

仪器:Gallios
抗体使用:CD3、CD4、CD8、CD19、CD56、CD45(其他由于没用上就不写了,主要不是看颜色所以没写荧光素)。
软件分析:Kaluza 1.2

步骤1:先圈出淋巴细胞群(Lym=CD45+),然后再把其他抗体的阳性群用水平门在直方图上画出来,并注明相应的抗体名称,以便后面分析。

步骤-1

步骤-1

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流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2013-6-27 21:32:56 | 显示全部楼层

如果加上小细胞群的话,细胞群的分类可以达到理论上的所有分子marker的所有排列组合分析,二维图是在已知细胞群的基础上一层层剥到目的细胞群,这个雷达图可以不局限已有的经验,根据marker的相对位置显示所有的交叉细胞群,很有利于新细胞群发掘
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2013-6-26 19:17:10 | 显示全部楼层
本帖最后由 didi_zhou 于 2013-6-26 19:32 编辑

步骤2:做雷达图,添加需要分析的门控(阳性群),然后根据他们之间的关系排列。(我是这么排列的,大家可能有更好的方法,我们可以讨论:)

步骤-2

步骤-2
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 楼主| 发表于 2013-6-26 19:21:14 | 显示全部楼层
本帖最后由 didi_zhou 于 2013-6-26 19:33 编辑

步骤-3 根据抗原之间的关系,把他们分成N群,标上名字,我相信你们肯定懂的:)

步骤-3

步骤-3
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 楼主| 发表于 2013-6-26 19:25:13 | 显示全部楼层
本帖最后由 didi_zhou 于 2013-6-26 19:33 编辑

现在往回看看,是不是跟散点图都对应的上?

还有其实CD56+NK里面其实有上下两群(CD8-/CD8+),还可以细分,不过具体意义我不是很清楚,请@niwanmao 倪老师解答一下。

里面还有很多小的群,大家能看出来么?雷达图还是很好玩的!

对应回散点图

对应回散点图
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 楼主| 发表于 2013-6-26 19:43:47 | 显示全部楼层
另外Kaluza的树形图也蛮好玩的!想要不看图直接要结果的同学也可以这么玩。

树形图

树形图
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发表于 2013-6-26 19:55:10 | 显示全部楼层
didi_zhou 发表于 2013-6-26 19:25
现在往回看看,是不是跟散点图都对应的上?

还有其实CD56+NK里面其实有上下两群(CD8-/CD8+),还可以 ...

非常漂亮的雷达图,不过一下子还不太适应,呵呵。

我平时在正常人骨髓中也是经常看到CD56+的NK细胞是分成两群主要的群体,一群CD8+,一群CD8阴性。其中CD8+那群可能对免疫功能更重要:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7587727
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 楼主| 发表于 2013-6-26 19:57:40 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-6-26 19:55
非常漂亮的雷达图,不过一下子还不太适应,呵呵。

我平时在正常人骨髓中也是经常看到CD56+的NK细胞是分 ...

哈哈,我也是昨天晚上才开始玩雷达图的。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2013-6-26 20:32:29 | 显示全部楼层
didi_zhou 发表于 2013-6-26 19:57
哈哈,我也是昨天晚上才开始玩雷达图的。

我觉得得在软件上拖动这些坐标才看的懂,光看这么一个静止的,我得费很大的脑筋去想这个坐标对应哪个,那个坐标对应哪个
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 楼主| 发表于 2013-6-26 20:37:13 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-6-26 20:32
我觉得得在软件上拖动这些坐标才看的懂,光看这么一个静止的,我得费很大的脑筋去想这个坐标对应哪个,那 ...

确实……拖起来还真是有动态效果的……,不过也许以后分析固定的群落可以用固定的数轴排列方式,那么出来的群落也可以是固定了。

如果有高手来试试白血病的10色分析,说不定会有更简单的组合和分析方法,有新的趋势图可以参考。
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发表于 2013-6-26 20:55:52 | 显示全部楼层
didi_zhou 发表于 2013-6-26 20:37
确实……拖起来还真是有动态效果的……,不过也许以后分析固定的群落可以用固定的数轴排列方式,那么出来 ...

10色更加看不清了吧
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