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[其它] ROS结果出现两个峰

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发表于 2015-1-12 13:59:06 | 显示全部楼层 |阅读模式

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请问,我测的ROS结果出现两个峰,一大一小,大家知道该怎样分析结果吗?
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发表于 2015-1-12 14:49:02 | 显示全部楼层
两个峰是有可能出现的,例如Nature一篇文章: nature07733-f1.2.jpg

http://www.nature.com/nature/jou ... nature07733_F1.html


不过你不用太在意,只需根据Control设置Marker位置,分析ROS阳性率或MFI变化:
F6.large.jpg

http://clincancerres.aacrjournal ... 4/1140/F6.expansion
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 楼主| 发表于 2015-1-12 16:40:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-1-12 14:49
两个峰是有可能出现的,例如Nature一篇文章:

http://www.nature.com/nature/journal/v458/n7239/fig_tab/ ...

老师,请问,ROS阳性区是不是以对照的峰型自己设的?我测出的大部分是图中的样子,老师请问这样正常吗?
12.png
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发表于 2015-1-12 16:48:12 | 显示全部楼层
韵古风 发表于 2015-1-12 16:40
老师,请问,ROS阳性区是不是以对照的峰型自己设的?我测出的大部分是图中的样子,老师请问这样正常吗? ...

如对照是这个位置,就是么画吧。你的对照图形如何?
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 楼主| 发表于 2015-1-12 17:38:26 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-1-12 16:48
如对照是这个位置,就是么画吧。你的对照图形如何?

对照是不加药的空白组吗?对照也差不多这个样子,感觉差异不是很大,不知道该怎么分析。是看P2区域的平均荧光强度值还是看P2区域的细胞数呢。
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发表于 2015-1-13 08:49:42 | 显示全部楼层
韵古风 发表于 2015-1-12 17:38
对照是不加药的空白组吗?对照也差不多这个样子,感觉差异不是很大,不知道该怎么分析。是看P2区域的平均 ...

把对照的图也传上来。如果对照也是这样子,那么门就不能这么设,说明你可能电压还是偏高。
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 楼主| 发表于 2015-1-13 22:59:16 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-1-13 08:49
把对照的图也传上来。如果对照也是这样子,那么门就不能这么设,说明你可能电压还是偏高。 ...

未加探针.png 未加药 .png 加药.png
老师,以上三幅图分别是不加探针的,不加药加探针和加药加探针的。我不确定该怎么分析。
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发表于 2015-1-14 08:54:49 | 显示全部楼层
韵古风 发表于 2015-1-13 22:59
老师,以上三幅图分别是不加探针的,不加药加探针和加药加探针的。我不确定该怎么分析。
...

嗯,那看来确实是高。
建议:
1、把阳性marker的左边界设在对照偏右位置,如下图红线位置
2015-01-14_085209.png

2、你应该用的是DCFDA吧?那只要用一个阳性门即可,读出阳性门内百分比和geomean值进行对比。
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 楼主| 发表于 2015-1-14 19:16:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-1-14 08:54
嗯,那看来确实是高。
建议:
1、把阳性marker的左边界设在对照偏右位置,如下图红线位置

老师的意思是把P2,P3门合并为一个门吗?看总的百分比?
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发表于 2015-1-14 21:02:52 | 显示全部楼层
韵古风 发表于 2015-1-14 19:16
老师的意思是把P2,P3门合并为一个门吗?看总的百分比?

是的。你为什么要设两个门?
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