Treg检测推荐采用的抗体组合

niwanmao

Treg已经有大量的文献研究，证实其与癌症预后密切相关，Treg数量高、活性强，往往会使癌症患者OS缩短。

流式细胞术对Treg的精确计数受到两个因素阻碍：
（a）无法直接测量其功能。
（b）不存在排他性、高度特异性的标记。

因此，2015年Santegoets 等人发表在Cancer Immunol Immunother上的《Monitoring regulatory T cells in clinical samples: consensus on an essential marker set and gating strategy for regulatory T cell analysis by flow cytometry》一文收集了研究中使用的17个标记，在10名专家中达成了关于Treg计数的基本标记共识。共识汇总如下表：


大家认为，理想的Treg组合应该是：

首先，基本标记组合应该能够排除掉那些表达Treg基本标记、但不产生IFNγ和IL-2的其它T细胞。

其次，由于设门时采用了三种Treg定义（CD25posCD127lowFoxp3pos Tregs、Foxp3posHeliospos Tregs、Foxp3hiCD45RAneg aTreg和Foxp3intCD45RApos nTregs），所以鉴定的细胞群应该是高度特异性的，并且所有这三个定义至少包括相同的Treg群体。

第三，推荐的组合应该是稳健、无争议，并且不受设门位置轻微移动影响，因为已经发现设门的差异是测量误差的最大来源。

第四，如果可能，应该能够评估其功能。

这里提到设门位置的放置，其实值得很多做科研FLOWER借鉴的是，和临床免疫分型类似，作者亦提倡使用内对照，即采用CD3pos CD4neg和CD3neg设置CD25、CD127、Helios、CD45RA等标记的阴阳性分界位置，这样比FMO、同型更稳健、更可靠。

最后形成的Treg检测方案是：

必需：CD3、CD4、CD25、Foxp3、CD127。
强烈推荐：Ki67、CD45RA。
可选：CTLA4、Helios、CD39、LAP/GARP

文献来源：https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00262-015-1729-x

btx362237729

好东西 谢谢分享

长风万里无云

想请教一下，我CD25和需要破膜的一起染就会掉，就是在需破膜的panel里就染不上，是什么原因呢。

niwanmao

长风万里无云 发表于 2017-5-22 15:33
想请教一下，我CD25和需要破膜的一起染就会掉，就是在需破膜的panel里就染不上，是什么原因呢。 ...

已回复：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5893-1-1.html

angelajia123

觉得很有帮助。