绝对计数

zhchzh87 · 发表于 2012-3-28 09:06:09

谢谢，我看说明书了，上面有推荐的同型对照，可是当时买试剂时没买，现在订，要等一段时间才能到。这个同型对照理论上应该每个标本都做一管，而不是一批（10个或20个）只做一管即可，是吧？

niwanmao · 发表于 2012-3-28 09:45:31

zhchzh87 发表于 2012-3-28 09:06

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谢谢，我看说明书了，上面有推荐的同型对照，可是当时买试剂时没买，现在订，要等一段时间才能到。这个同型 ...

如果你一批标本都是相同的细胞，那么只要做一管即可。

zhchzh87 · 发表于 2012-3-28 16:16:14

非常感谢

gjy5386 · 发表于 2012-3-30 10:11:03

请教，哪些情况需要做封闭处理呢？有时候遇到同型对照尽然比样本表达还高，很无语，这种情况是否该做封闭处理?

zhchzh87 · 发表于 2012-5-9 09:41:09

niwanmao 发表于 2012-3-28 09:45

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如果你一批标本都是相同的细胞，那么只要做一管即可。

谢谢倪老师，现在又出现了新的问题：绝对计数公式为：（获取细胞数×beads总数）／（获取Beads数×样本量），这个样本量是多少？我上机时，绝对计数管内为：50ul标本+10ul抗体+440ulPBS，样本量为标本量50还是总体积500？谢谢

niwanmao · 发表于 2012-5-9 12:15:55

gjy5386 发表于 2012-3-30 10:11

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请教，哪些情况需要做封闭处理呢？有时候遇到同型对照尽然比样本表达还高，很无语，这种情况是否该做封闭处 ...

试试FMO对照看。

niwanmao · 发表于 2012-5-9 12:24:47

zhchzh87 发表于 2012-5-9 09:41

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谢谢倪老师，现在又出现了新的问题：绝对计数公式为：（获取细胞数×beads总数）／（获取Beads数×样本量 ...

你这个公式应该算出的是细胞密度，样本量是500这个总体积。
如果你要计数总细胞数，那么样本量这个数值就不需要放进公式了。

zhchzh87 · 发表于 2012-5-9 14:02:29

niwanmao 发表于 2012-5-9 12:24

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你这个公式应该算出的是细胞密度，样本量是500这个总体积。
如果你要计数总细胞数，那么样本量这个数值就 ...

谢谢，我还是不明白。
1、上机检测用的相当于对标本进行了10倍稀释，那我算实际标本中的细胞密度，是不是先除以500后还要再乘以10才对呢？这样不就同直接除以50一样了么？
2、可以直接“50ul标本+10ul抗体”孵育后，上机，管中不加PBS，算时除以样本量60，这样可以吗？

niwanmao · 发表于 2012-5-9 14:23:41

zhchzh87 发表于 2012-5-9 14:02

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谢谢，我还是不明白。
1、上机检测用的相当于对标本进行了10倍稀释，那我算实际标本中的细胞密度，是不是 ...

你就简单一点算，按照数学上等比例：
获取的beads 获取的细胞
———————＝——————
总beads数总细胞数

进行转换，就得到总细胞数＝（获取的细胞×总beads数）÷获取的beads
所以，你就直接计算总细胞数得了，省得跟体积计较。
如果要计算密度，那么就把总细胞数，除以你的标本体积50ul，就是原始的细胞密度。

virginforest · 发表于 2012-5-17 00:13:43

站长大哥，我崇拜你，解释的很清楚

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