PBMC 复苏

奋斗的ida

悠游 发表于 2023-6-26 12:06
有可能是因为细胞太多了，一般一管冻存10^7个就够用了

这个问题也考虑过，已经减少冻存细胞量，但问题依然存在。谢谢。

悠游

奋斗的ida 发表于 2023-6-26 12:09
这个问题也考虑过，已经减少冻存细胞量，但问题依然存在。谢谢。

好的，那我就说一下我这边的流程吧，仅供参考

细胞冻存液是DMSO：FBS：基础培养基（含1%双抗）=1:2:7，然后冻存浓度在5*10^6-1*10^7之间，梯度冻存

复苏的时候，
在离心管里提前准备好9mL完全培养基，
冻存管37度水浴，2分钟内融化后，立即加到准备好的离心管里
800转离心5分钟
去上清，用完全培养基重悬，计数

srfts

建议换CS10无血清培养基。。