使用flowjo时，如何根据对照样本设置阳性细胞率

niwanmao

喃呢 发表于 2023-7-27 11:08
如果未刺激组也有细胞因子表达，那该怎么确定阳性门？

生物学对照，是要求不表达。如果表达了，就不适合。

喃呢

niwanmao 发表于 2023-7-28 10:48
生物学对照，是要求不表达。如果表达了，就不适合。

那这种情况下改怎么设置圈门对照呢？

niwanmao

喃呢 发表于 2023-8-7 15:59
那这种情况下改怎么设置圈门对照呢？

1、必须找明确不表达该标记的生物学阴性对照，明白了没？
2、实在找不到，用Fc阻断后的样本替代，但结果仍需结合实际表达情况综合判断。

喃呢

niwanmao 发表于 2023-8-7 19:58
1、必须找明确不表达该标记的生物学阴性对照，明白了没？
2、实在找不到，用Fc阻断后的样本替代，但结果 ...

嗯，第一点我明白了。您说的FC阻断后的样本是指的什么？

niwanmao

喃呢 发表于 2023-8-8 09:21
嗯，第一点我明白了。您说的FC阻断后的样本是指的什么？

与实验组同样的样本，用Fc阻断剂阻断处理，但效果可能会不好，偏弱。

喃呢

niwanmao 发表于 2023-8-8 22:15
与实验组同样的样本，用Fc阻断剂阻断处理，但效果可能会不好，偏弱。

需要染色吗？FC阻断的目的是排除非特异性结合？

niwanmao

喃呢 发表于 2023-8-9 08:34
需要染色吗？FC阻断的目的是排除非特异性结合？

Fc阻断，在对照管和实验管均需要。对照管不染抗体，实验管染抗体。因为进行Fc阻断后，相对来说，因Fc受体引起的非特异性染色可减少或消除。

喃呢

niwanmao 发表于 2023-8-9 21:02
Fc阻断，在对照管和实验管均需要。对照管不染抗体，实验管染抗体。因为进行Fc阻断后，相对来说，因Fc受体 ...

明白了，谢谢