CCR2没有表达？

麦小光

附带了pdf文件，以供参考

瓜瓜999

麦小光 发表于 2024-6-12 13:04
对的，中低表达的蛋白，配合低效价的抗体，再整上低亮度的荧光素，基本上就是一个大写的GG，流式配色不能 ...

非常感谢，刚开始我们还找BD公司的人帮我们看了一下gating strategy，还有流式配色。BD说没啥问题我们才用的，看来踩雷了╥﹏╥...

瓜瓜999

Fusca 发表于 2024-6-11 21:11
对的，因为我们要分选CCR2+/-单核，专门测试过各家的抗体，这家的真的染不出来单核，我推荐的那几个起码我 ...

非常感谢😃 正好我们都有这些抗体，之后试一下。当时还让BD帮我们看了我们设计的，没想到踩雷了😣

瓜瓜999

Fusca 发表于 2024-6-11 21:11
对的，因为我们要分选CCR2+/-单核，专门测试过各家的抗体，这家的真的染不出来单核，我推荐的那几个起码我 ...

关于CCR2，FACS Diva里的detector是V810，fluorochrome是BV785。我查了一下BV758表现出a medium level of brightness。

瓜瓜999

Fusca 发表于 2024-6-11 11:58
CCR2染不出来很多情况下都是因为抗体不行和强度不够。小鼠的CCR2抗体最推荐用R&D的，但是要注意效期，此外 ...

请问intubation的温度，你们是4度？室温？还是37度？
我之前一直是4度。最近发现CCR2好像要37度。https://www.rndsystems.com/blog/ ... eceptors-live-cells
我问了biolegend他们建议室温或者37。

Fusca

瓜瓜999 发表于 2024-7-31 19:00
请问intubation的温度，你们是4度？室温？还是37度？
我之前一直是4度。最近发现CCR2好像要37度。https:/ ...

我们一直都是用的4度孵育，不过是用的R&D的抗体。

瓜瓜999

最近做了血液的流式，结果发现几乎没有CCR2细胞

瓜瓜999

Fusca 发表于 2024-6-11 21:11
对的，因为我们要分选CCR2+/-单核，专门测试过各家的抗体，这家的真的染不出来单核，我推荐的那几个起码我 ...

最近做了血液的流式，发现Ly6c+细胞里的CCR2几乎没有，说明这个抗体不行吗？

niwanmao

瓜瓜999 发表于 2024-11-29 04:04
最近做了血液的流式，发现Ly6c+细胞里的CCR2几乎没有，说明这个抗体不行吗？ ...

有没有试过用LPS刺激后再检测，或可作为阳性对照？

瓜瓜999

niwanmao 发表于 2024-11-29 09:05
有没有试过用LPS刺激后再检测，或可作为阳性对照？

没有试过，直接染色固定。