实验指导，恳请大家帮助

CRP

niwanmao 发表于 2012-3-2 21:42

                               
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你们平时应该做过其他fitc，pe的标记吧？就是做那些标记的时候电压、补偿可以拿来做参考。
...

我有做过的，好，我先试试看，谢谢您了！

zark_00

做成了别忘了发点图上来，老兄，学习学习

gcz5340

      当时应该选用CD8-APC，难道机器不能检测APC，现在ECD、PE都离得很近，可能补偿蛮多。
    病人外周血TH1/TH2刺激我们做过，PMA/莫能/离子霉素刺激4h，IFN－r还是蛮多的补偿可以调，高的时候达到50％左右（吸毒病人），IL-4比较少。

niwanmao

gcz5340 发表于 2012-3-3 00:18

                               
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当时应该选用CD8-APC，难道机器不能检测APC，现在ECD、PE都离得很近，可能补偿蛮多。
    病人外周血 ...

IFN－γ是可以调，我去年帮儿童医院一位朋友做过小孩子的Th1，结果Th1基本上都在30％以内，接近30％的也没几个（占CD3＋CD8－细胞的比例，不是全部淋巴细胞的比例），达不到50％这么高，不过调节补偿倒是可以。同时发现同一病人身上，反而CD3＋CD8＋的IFN－γ表达率比CD3＋CD8－的细胞高。
IL－4基本上在10％以内，成群很不明显。

CRP

gcz5340 发表于 2012-3-3 00:18

                               
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当时应该选用CD8-APC，难道机器不能检测APC，现在ECD、PE都离得很近，可能补偿蛮多。
    病人外周血 ...

BC的是不能用APC的
CD8- -Texas Red还是定做的
我用的是细胞因子刺激，应该阳性率不会太低，像IL-12或IL-4之类的。

CRP

CRP 发表于 2012-3-2 20:56

                               
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哦，那我搞错了，我还第一次听说这个，有相关文献吗？

我明白了，您的意思是说，用表面的CD69作为早期的活化标志，而用包内的CD69作为胞内染色是否成功的判定？那就做一个加与不加BFA的对照即可。

不知道我理解对否？

CRP

ddn111 发表于 2012-3-2 13:38

                               
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提醒一点的是，表面CD69和胞内CD69是有差异的！我指的对照是胞内CD69！用来确定胞内染色是否成功！而表面C ...

我明白了，您的意思是说，用表面的CD69作为早期的活化标志，而用包内的CD69作为胞内染色是否成功的判定？那就做一个加与不加BFA的对照即可。

不知道我理解对否？

niwanmao

CRP 发表于 2012-3-7 16:13

                               
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我明白了，您的意思是说，用表面的CD69作为早期的活化标志，而用包内的CD69作为胞内染色是否成功的判定？ ...

我觉得ddn111应该是这个意思。