利用流式细胞仪分离人类女性卵巢中的雌性生殖干细胞

niwanmao

a2782953 发表于 2012-3-11 23:04

                               
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正如老师所说，我一直看不懂的就是作者的这个图，当时怎么想都不明白，后面的补充材料中也看了，当时看完 ...

1.如果c图是这样的话，那么d图是不是也认为坐标轴的标识是不合适的 ？
D图中的坐标是对的，是两个标记同时标的。

2.作者在这个文章中没有用同型对照吧，我看补充材料中也没说这个？
是没用同型，只用阴性对照。
     
3.关于同型对照的问题
你提到的概念是正确的：“与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白”。这东西跟一抗不一样，你举例子中提到的一抗为 FITC 偶联的小鼠 IgG1，你肯定是特异性针对某个位点的，比如针对CD3的，针对CD4的等等。而同型对照是跟所有位点都有可能存在非特异性结合的Ig，这种非特异性结合的特性在所有同类型抗体中都存在的，所以用来排除那些非特异性结合。

niwanmao

a2782953 发表于 2012-3-12 03:00

                               
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倪老师：

     刚才我跟文章的作者联系了一下，作者说 他们之所以把Anti-rabbit-APC标到纵坐标上是因为 ...

这个我也理解不了，呵呵。

a2782953

谢谢倪老师的详细解答！！

非常感谢！！

niwanmao

a2782953 发表于 2012-3-12 13:48

                               
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谢谢倪老师的详细解答！！

非常感谢！！

大家一起讨论，我觉得气氛特别热闹。最主要是你的问题提的特别详细，可以说不算问题，而算是一种知识分享。强烈希望你以后能够多多提这些高质量的问题。

a2782953

niwanmao 发表于 2012-3-12 14:09

                               
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大家一起讨论，我觉得气氛特别热闹。最主要是你的问题提的特别详细，可以说不算问题，而算是一种知识分享 ...

    呵呵，其实对这个图真的很纠结的，问了很多人，都搞不明白作者为什么这么标记这个图。即使按照作者说的，他标在纵坐标上的那个 anti-rabbit-APC 是用来排除自发荧光的，但是横坐标上也不能只标一个anti-gout-488么。他在补充材料和邮件中都说了 用了两种抗体 anti-rabbit-488及anti-gout-488。首先，这不可能是同时标记的吧？！否则都是488，发出的荧光都一样，也没法分辨吧？就像上面斑竹和站长做出的解释，Figure1c 第一张图中：COOH端是用anti-rabbit-488来结合的，那这张图横坐标也应该用 anti-rabbit-488来标记吧。难不成他在做第一张图这个实验的时候 ，用anti-rabbit-488和anti-gout-488同时与结合了COOH的一抗孵育了？这也没啥意义吧？！真搞不清楚作者咋整的了。。。。

niwanmao

a2782953 发表于 2012-3-12 17:46

                               
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呵呵，其实对这个图真的很纠结的，问了很多人，都搞不明白作者为什么这么标记这个图。即使按照作者说 ...

反正看懂就算了，可能是老外粗心，也可能是我们想象力不够丰富