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楼主: gcz5340

Live-dead kit去死细胞,你还在用PI、7AAD吗?

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发表于 2012-10-16 17:13:14 来自手机 | 显示全部楼层

时间比较久了,是有一次抗体接不上用,临时拿来应急。哪个抗体我倒是一下子想不起来了。
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发表于 2012-10-16 17:15:40 来自手机 | 显示全部楼层
gotofcm 发表于 2012-10-16 10:13:13

呵呵,你都用过哪些呀?没听你说过有啥不好嘛。

主要并不是说它把阳性测成阴性,而是说它相对来说荧光指数偏低,不能减量
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发表于 2013-1-23 13:21:41 | 显示全部楼层
想请教下楼主,区分死活用PI和7AAD都必须是在没有固定的细胞,是吗?固定后细胞就是死细胞了吗?7AAD就全是阳性的,对吗?
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发表于 2013-1-23 17:46:46 来自手机 | 显示全部楼层
alina1123 发表于 2013-01-23 13:21:41
想请教下楼主,区分死活用PI和7AAD都必须是在没有固定的细胞,是吗?固定后细胞就是死细胞了吗?7AAD就全是

需要新鲜不固定的,否则会导致假阳性
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发表于 2019-11-17 16:50:35 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-1-23 17:46
需要新鲜不固定的,否则会导致假阳性

请问下倪老师,如果是先用PI和7AAD先染细胞死活,然后洗涤离心,后面再固定破膜,这样对于细胞死活判断有影响吗,谢谢。
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发表于 2019-11-17 21:19:23 | 显示全部楼层
gwrr12345 发表于 2019-11-17 16:50
请问下倪老师,如果是先用PI和7AAD先染细胞死活,然后洗涤离心,后面再固定破膜,这样对于细胞死活判断有 ...

最后会发现这两种染料的信号出不来。
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发表于 2019-11-17 22:38:56 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-11-17 21:19
最后会发现这两种染料的信号出不来。

谢谢倪老师的回答,这是因为什么原因呢?自己刚入门不是很懂,还请倪老师不吝赐教,谢谢!
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发表于 2019-11-18 19:56:05 | 显示全部楼层
gwrr12345 发表于 2019-11-17 22:38
谢谢倪老师的回答,这是因为什么原因呢?自己刚入门不是很懂,还请倪老师不吝赐教,谢谢! ...

主要是固定成份里面基本上离不开多聚甲醛,而多聚甲醛对PI染色有影响。
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发表于 2019-11-18 21:49:16 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-11-18 19:56
主要是固定成份里面基本上离不开多聚甲醛,而多聚甲醛对PI染色有影响。

谢谢,明白了
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