调节性T细胞分析（foxP3＆CD127）

Kimbryant

全血跟分PBMC测Treg细胞的步骤一样吗

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 13:32
全血跟分PBMC测Treg细胞的步骤一样吗

你用什么破膜剂，如果破膜剂没有裂解红细胞作用，那么全血就需要加上裂解红细胞一步，如果有，那么两者就一样。

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 19:07
你用什么破膜剂，如果破膜剂没有裂解红细胞作用，那么全血就需要加上裂解红细胞一步，如果有，那么两者就 ...

我用的是eBioscience的，这个是我之前做的，Treg几乎无表达啊，是我破膜没破成功吗

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 19:07
你用什么破膜剂，如果破膜剂没有裂解红细胞作用，那么全血就需要加上裂解红细胞一步，如果有，那么两者就 ...

CALTAG的套装可以直接用来做全血吗？跟PBMC的步骤一样吧？因为B试剂有破膜作用

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 20:01
CALTAG的套装可以直接用来做全血吗？跟PBMC的步骤一样吧？因为B试剂有破膜作用 ...

fix&Perm可以做胞内，但不能做核内的，所以foxP3不行。

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:09
fix&Perm可以做胞内，但不能做核内的，所以foxP3不行。

老师能不能帮我看下上面的流式图，是FOXP3没标上吗

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 20:11
老师能不能帮我看下上面的流式图，是FOXP3没标上吗

CD4、CD25、foxP3分别是什么荧光标记？

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:17
CD4、CD25、foxP3分别是什么荧光标记？

4 FITC,25 PE-CY7，FOX PE-CY5

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:17
CD4、CD25、foxP3分别是什么荧光标记？

是破膜的问题吗？还是抗体量不够，没标上？

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 20:20
4 FITC,25 PE-CY7，FOX PE-CY5

从图中看似乎CD25都没有，CD4的分群也一般般。应该还是染色上的问题。