调节性T细胞分析（foxP3＆CD127）

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:34
从图中看似乎CD25都没有，CD4的分群也一般般。应该还是染色上的问题。

是抗体的量不够吗？我CD4加了4微升，CD25，FOXP3都是3微升

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 20:38
是抗体的量不够吗？我CD4加了4微升，CD25，FOXP3都是3微升

你减量了？抗体量和孵育体积都是有要求的，全量的抗体一般对应的是100ul反应体积。

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:46
你减量了？抗体量和孵育体积都是有要求的，全量的抗体一般对应的是100ul反应体积。 ...

反应体系是100微升，全量抗体没听过？都是问的师姐加多少，老师你用全血做过吗？抗体的量一般多少

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 20:50
反应体系是100微升，全量抗体没听过？都是问的师姐加多少，老师你用全血做过吗？抗体的量一般多少 ...

全量的抗体就是看说明书上让你加多少

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:55
全量的抗体就是看说明书上让你加多少

但我们做PBMC的时候就用的我这个量，结果还行，说明书上的量不偏大吗？全血Treg的图是老师做的吗？您的抗体量是根据说明书上的吗？老师用的是eBioscience的套装吗？

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 21:01
但我们做PBMC的时候就用的我这个量，结果还行，说明书上的量不偏大吗？全血Treg的图是老师做的吗？您的抗 ...

我曾经用过ebioscience的没做出foxP3，后来改用CD4、CD25、CD127表面组合

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 21:04
我曾经用过ebioscience的没做出foxP3，后来改用CD4、CD25、CD127表面组合

那这个帖子的第一张全血的图是谁做的？

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-17 21:08
那这个帖子的第一张全血的图是谁做的？

这是网上的资源，似乎是FCS Express软件网站的wiki中的。

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-6-17 21:40
这是网上的资源，似乎是FCS Express软件网站的wiki中的。

除了做单染管，要做FOXP3的同型对照吗

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-6-24 21:24
除了做单染管，要做FOXP3的同型对照吗

foxP3分群还可以的，不做问题不大。不过从标准操作角度，还是建议做一个，选择正确的Ig亚型，并且处理方式与foxP3完全相同。