胰酶消化制备样品，对细胞的表型什么的有影响吗

niwanmao

20071271 发表于 2013-11-5 09:47

                               
登录/注册后可看大图

但又不能不用胰酶消化，怎么办呢，特别是染色都比较dim的情况下，如何是好 ...

别纠结了，做吧。各种实体组织细胞的文章都这么做下来的

20071271

niwanmao 发表于 2013-11-4 18:53

                               
登录/注册后可看大图

感谢@dragonhzqsmmu 站友的分享，确实跟酶有些关系。我将该文中的相关章节摘录如下：

To separate indiv ...

那胰酶的影响有多大呢

niwanmao

20071271 发表于 2013-11-5 09:51

                               
登录/注册后可看大图

那胰酶的影响有多大呢

至少在我帮研究生做的那些实验中，没注意到。只需排除死细胞即可。

上面这篇文章，我觉得一方面他们研究的是胶原酶的影响，另一方面研究的是淋巴细胞标记，这两方面跟你的实验都没关系。所以无需过分担心。排除死细胞才是关键所在。

20071271

niwanmao 发表于 2013-11-5 09:53

                               
登录/注册后可看大图

至少在我帮研究生做的那些实验中，没注意到。只需排除死细胞即可。

上面这篇文章，我觉得一方面他们研究 ...

我的一篇文章里面，一个外导问了我这么一个问题。我是被逼的

dragonhzqsmmu

给个建议，不知道对不对，试试美天旎的组织粉碎仪器，记得BD公司也有类似的产品，好像基本上依赖物理作用，http://www.biomart.cn/news/16/64601.htm

不过这个的耗费估计不小（仪器和一次性使用耗材，我们之前也想用，不过太贵了，用不起啊），大部分的文章还是用的酶消化的方法，严谨的话条件可以摸索一下，比如试试比胰酶效力温和的胶原酶，或者几种胶原酶的混合制剂或者小比例胰酶加大比例的胶原酶，胶原酶的选择需要结合你分离实体样本的成分来确定

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-11-7 11:31

                               
登录/注册后可看大图

给个建议，不知道对不对，试试美天旎的组织粉碎仪器，记得BD公司也有类似的产品，好像基本上依赖物理作用， ...

组织研磨器是只针对组织团块，对于培养的贴壁细胞还是只能用胰酶消化了。

我们平时在临床上都是用BD的medimachine研磨组织块，发现得率不高，所以如果要做，需尽可能获得比较多的组织。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-11-7 11:36

                               
登录/注册后可看大图

组织研磨器是只针对组织团块，对于培养的贴壁细胞还是只能用胰酶消化了。

我们平时在临床上都是用BD的me ...

我刚想回复BD的组织处理器的链接，http://www.bdbiosciences.com/nvC ... ts%20and%20Software

只能说管理员真乃土豪也，当时问过BD公司的这个东东的报价，立马熄火，开玩笑的

20071271

dragonhzqsmmu 发表于 2013-11-7 11:31

                               
登录/注册后可看大图

给个建议，不知道对不对，试试美天旎的组织粉碎仪器，记得BD公司也有类似的产品，好像基本上依赖物理作用， ...

我们有组织粉碎器，但是这个是胚胎组织，非常小，自己感觉胰酶消化挺好的。不知道咋搞的

dragonhzqsmmu

20071271 发表于 2013-11-7 12:09

                               
登录/注册后可看大图

我们有组织粉碎器，但是这个是胚胎组织，非常小，自己感觉胰酶消化挺好的。不知道咋搞的 ...

那就先做了再说，不做不知道，说不定没问题呢，或者酶消和组织粉碎两个都试一下，比较一下看看那个结果更好用哪个，期待LZ的结果啦