人treg细胞流式检测遇到问题

niwanmao · 发表于 2014-6-12 20:34:40

彩虹xy 发表于 2014-6-12 15:58
倪老师好，我按您的建议做了FMO管，增加了CD4CD25管，并且阴性管、CD4、CD25、FOXP3管都进行了破膜固定，请 ...

发现你做的质量很好，分群很清楚，不用FMO都没问题。
用NOVOEXPRESS帮你分析了下，结果如下，因为我这边打开时没显示标记，所以不知道手工填写的标记对不对。

彩虹xy · 发表于 2014-6-13 21:57:19

谢谢倪老师，是这样的染色方案，那以您看我以后就按这样的染色方案和上机的电压条件做可以吗？我以后每次检测的时候还需不需要做阴性管和单标管，每次都要做阴性管和单标管非常的耗费细胞，我以后只做样本管可以吗？
还是阴性管+FMO管+样本管 or 阴性管+样本管 or FMO管+样本管？
如果只做样本管可以就好了，因为我是从60ml外周血中提取的CD4细胞，十分珍贵呀

niwanmao · 发表于 2014-6-13 22:15:36

彩虹xy 发表于 2014-6-13 21:57
谢谢倪老师，是这样的染色方案，那以您看我以后就按这样的染色方案和上机的电压条件做可以吗？我以后每次检 ...

你做的很好，细胞分群非常清楚，所以只做样本管即可。

彩虹xy · 发表于 2014-6-14 10:24:09

niwanmao 发表于 2014-6-13 22:15
你做的很好，细胞分群非常清楚，所以只做样本管即可。

谢谢倪老师.

Kimbryant · 发表于 2014-6-16 22:31:39

如果我要测Treg上面的Tim3的话是不是还要加个Tim3的单标管

niwanmao · 发表于 2014-6-16 22:34:41

Kimbryant 发表于 2014-6-16 22:31
如果我要测Treg上面的Tim3的话是不是还要加个Tim3的单标管

如果要测Treg上的Tim3，那么就需要做一管CD4/CD25/foxP3的管子（不加Tim3）作为FMO设门对照。

Kimbryant · 发表于 2014-6-16 22:40:16

固定破膜套装哪家的好一点啊？一定要按说明书来吗？说明书上的量1ML，但我们实验室都是200微升

Kimbryant · 发表于 2014-6-17 14:37:54

倪老师，能不能帮我看下这个流式结果？Treg表达好低，是全血做的，是不是破膜时间不够，破膜没破好？所以FOXP3标不上？

Kimbryant · 发表于 2014-6-20 20:03:40

niwanmao 发表于 2014-6-16 22:34
如果要测Treg上的Tim3，那么就需要做一管CD4/CD25/foxP3的管子（不加Tim3）作为FMO设门对照。 ...

老师，这是我用全血做的Treg，好像有点问题

niwanmao · 发表于 2014-6-20 20:25:07

Kimbryant 发表于 2014-6-16 22:40
固定破膜套装哪家的好一点啊？一定要按说明书来吗？说明书上的量1ML，但我们实验室都是200微升 ...

最好按照说明书来做，别人能减是因为他们有经验，你呢？

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