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楼主: niwanmao

人人为我,我为人人--荧光扣除对照(FMO)

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 楼主| 发表于 2015-5-12 15:40:57 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-5-11 23:48
倪老师我有个问题:FMO对照可以用beads做吗?

你是指抗体用beads代替吗?可以的。基本上能够反映大概的情况。
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发表于 2015-5-12 15:54:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-5-12 15:40
你是指抗体用beads代替吗?可以的。基本上能够反映大概的情况。

嗯,我是指用beads代替细胞,就是补偿微球,同时加入多种抗体标记,能一起标记上吗?
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 楼主| 发表于 2015-5-12 16:24:43 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-5-12 15:54
嗯,我是指用beads代替细胞,就是补偿微球,同时加入多种抗体标记,能一起标记上吗? ...

前面口误,是你说的这个意思,补偿微球可以。
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发表于 2015-5-12 16:42:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-5-12 16:24
前面口误,是你说的这个意思,补偿微球可以。

又涨姿势了,谢谢倪老师~
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发表于 2015-6-14 17:30:26 | 显示全部楼层
老师,刚学流式,想问下,Fc受体抗体针对抗原的非特异性位点而设,同型对照是针对抗体的非特异性位点而设,FMO对照针对荧光渗漏而设,这样理解对吗?要是连续表达的话是必须设同型对照还是必须设FMO,我有点晕了。还有空白对照,也是必须的吗?FcR抗体既然已经用了,那同型对照为什么还要用呀。。同型对照和FMO都与设门有关吗?
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 楼主| 发表于 2015-6-14 21:48:22 | 显示全部楼层
shankelj1991 发表于 2015-6-14 17:30
老师,刚学流式,想问下,Fc受体抗体针对抗原的非特异性位点而设,同型对照是针对抗体的非特异性位点而设, ...

关于各种对照,此处有解答:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3888-1-1.html

Fc阻断只是阻断那些细胞表面Fc受体,减少背景水平,你不能用它来设门的啊,所以它与对照无关
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发表于 2015-12-11 16:29:51 | 显示全部楼层
老师,你好,我最近在做胞内因子IL10的染色,的确觉得设门有些困难。我开始用的是同型对照,按照我们实验室的常规,将同型对照控制在0.9-1.1,但是实验组的值就很高,而且感觉实验组的细胞群有上移的趋势,我觉得可能就是设门不对的问题。如果我每次都要做FOM,是否只做胞内因子的那个荧光就够了,而且我的细胞数不多,是否还需要同时做同型对照?
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 楼主| 发表于 2015-12-11 17:36:28 | 显示全部楼层
luoying1983121 发表于 2015-12-11 16:29
老师,你好,我最近在做胞内因子IL10的染色,的确觉得设门有些困难。我开始用的是同型对照,按照我们实验室 ...

做胞内因子的FMO对照即可。如果分群不明显,并且背景较高,还是需要同型对照的。
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发表于 2015-12-15 15:41:43 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-12-11 17:36
做胞内因子的FMO对照即可。如果分群不明显,并且背景较高,还是需要同型对照的。 ...

多谢,老师,我再试一下。
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发表于 2016-1-3 23:20:58 来自手机 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-3-31 10:57
C门是阴性区域门,B是最高表达的那群阳性细胞,至于高度,问题不是很大。上面示例中因为C门上面有少量非 ...

请问,怎么看出c区域上面是非特异染色的
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