人人为我，我为人人－－荧光扣除对照（FMO）

niwanmao

新武器 发表于 2016-1-3 23:20
请问，怎么看出c区域上面是非特异染色的

更准确地说法应该是非特异性荧光，因为FL6没有加抗体，所以C门上面的都是非特异性荧光造成，而不是真实的阳性。

DFL

niwanmao 发表于 2015-3-31 10:57
C门是阴性区域门，B是最高表达的那群阳性细胞，至于高度，问题不是很大。上面示例中因为C门上面有少量非 ...

老师，怎么知道C门上面是非特异性染色？

niwanmao

DFL 发表于 2018-3-16 04:04
老师，怎么知道C门上面是非特异性染色？

就看FL6，理论上该通道没加荧光抗体，FL6坐标上不应该出现阳性信号，所以在那里有疑似阳性的信号都归为非特异性的信号。

潘潘杰

niwanmao 发表于 2015-6-14 21:48
关于各种对照，此处有解答：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3888-1-1.html

Fc阻断只是阻断那些细胞 ...

老师，做了Fc Block将Fc受体封闭了，那荧光抗体还会非特异性结合吗？所以是不是可以直接拿blocking后的unstained管做阴性对照了，就没必要做isotope了，这就是重复啊？请老师解答，谢谢

Veblen

niwanmao 发表于 2015-5-12 15:40
单染看的是这个通道漏到其它通道的荧光有多少，而FMO则看的是其它通道漏到这个通道的荧光有多少，恰恰相 ...

老师 您好，做FMO的前提是不是必须把补偿调好？

Veblen

所以老师的意思是做了FMO就没有必要做同型对照，对吧

niwanmao

Veblen 发表于 2018-4-10 13:08
老师 您好，做FMO的前提是不是必须把补偿调好？

FMO对照和同型对照的概念，你搜索一下“对照”充分了解一下。
FMO对照主要排除荧光渗漏影响。
同型对照真心不建议用，大多数情况下，Fc Blocking可以替代。
上述概念之前很多帖子里面我都提过了。

命运线

倪老师，我想请问一下，我做巨噬细胞分析，用了同型对照，并没有做FMO对照，可以吗？

niwanmao

命运线 发表于 2019-3-29 22:32
倪老师，我想请问一下，我做巨噬细胞分析，用了同型对照，并没有做FMO对照，可以吗？
...

不知道你做的指标分群是否好。
至于已经做了的同型对照是否合适，主要看数据是否符合实际了。

ftyro

倪老师你好，FMO对照阳性门内细胞比例应该设置多少合适？