CD3分群不明显

niwanmao · 发表于 2015-4-20 19:25:00

hbezyr 发表于 2015-4-20 14:18
还有一种可能是不是CD3刺激后转入胞内了。看到在OMIP上，有人的CD3都放在了破膜后染的。 ...

大家讨论的思路很开阔。确实，@gaga1989xl 需要检查一下你的检测克隆号结合位点是不是胞内？

culturelily · 发表于 2015-4-23 14:43:44

个人拙见，抗体失效或者用错抗体了或者抗体太少，操作失误可能性高因为APC亮度很高无论怎么染都很容易分开你这个根本就不分群。

gaga1989xl · 发表于 2015-4-26 08:41:38

niwanmao 发表于 2015-4-20 10:27
嗯。那检查一下抗体本身的质量了。

谢谢倪老师，确实是抗体存在问题，与染色浓度也有关系，用分选后CD3染色同样分不开，而且只有30-50%的阳性率，换用另外一个克隆号PE标记的CD3染色后，分群非常明显，阳性率也达到95%以上了。

gaga1989xl · 发表于 2015-4-26 08:47:27

culturelily 发表于 2015-4-23 14:43
个人拙见，抗体失效或者用错抗体了或者抗体太少，操作失误可能性高因为APC亮度很高无论怎么染都很容易分开 ...

谢谢，已重复实验，个人用抗体时确实有减半量用，体系相应减小，换用别的抗体后效果完全不一样，个人觉得一是抗体量问题，二还是跟克隆号或者抗体本身的浓度有关。

gaga1989xl · 发表于 2015-4-26 08:48:45

niwanmao 发表于 2015-4-20 19:25
大家讨论的思路很开阔。确实，@gaga1989xl 需要检查一下你的检测克隆号结合位点是不是胞内？ ...

嗯，好的，谢谢大家，又有新发现，学习了！检查后再回复大家

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[淋巴细胞亚群] CD3分群不明显