流式细胞仪如何检测NK细胞活性，如何圈门？

chymanhz

我看了你的数据，基本上没什么问题，补偿也做好了。就是样本2补偿和十字门调好后再把设置拉回到第一个样本就好了。

xuexuqiong

chymanhz 发表于 2015-8-12 11:47
我看了你的数据，基本上没什么问题，补偿也做好了。就是样本2补偿和十字门调好后再把设置拉回到第一个样本 ...

好的，谢谢老师

水念人倦

想请问一下，中间的那个图是干啥用的？就是SSC-FITC的？另外想请问用H图比用A图的优势是什么呢？感觉很多老师都更喜欢用H图。

niwanmao

水念人倦 发表于 2015-8-14 08:40
想请问一下，中间的那个图是干啥用的？就是SSC-FITC的？另外想请问用H图比用A图的优势是什么呢？感觉很多老 ...

这种都不是强制性的规定。象楼主使用CD3 FITC和SSC，你也可以和其它标记或FSC圈门，关键是圈出CD3+细胞即可。

至于H和A，一般情况下无差别，据说CV值上可能会有点差异。也看个人喜好。

水念人倦

niwanmao 发表于 2015-8-14 15:15
这种都不是强制性的规定。象楼主使用CD3 FITC和SSC，你也可以和其它标记或FSC圈门，关键是圈出CD3+细胞即 ...

多谢倪老师！

xuexuqiong

niwanmao 发表于 2015-8-6 20:07
FSC/SSC散点图圈小一点，然后把第二个图的SSC用工具栏上的放大按钮放大，否则CD3圈起来都看不到，这样你最 ...

老师，我们要看的是NK细胞的活性，我查到NK细胞只表达CD3-,但是抗体标出来的都是CD3+,然后该怎么样才能达到我的目的？谢谢。

xuexuqiong

chymanhz 发表于 2015-8-6 22:22
好像补偿也没做好，把文件发上来帮你整理一下

老师，我们要看的是NK细胞的活性，我查到NK细胞只表达CD3-,但是抗体标出来的都是CD3+,然后该怎么样才能达到我的目的？谢谢。

chymanhz

xuexuqiong 发表于 2015-8-21 13:21
老师，我们要看的是NK细胞的活性，我查到NK细胞只表达CD3-,但是抗体标出来的都是CD3+,然后该怎么样才能达 ...

是做细胞毒实验？加了抗体细胞不是都死了

xuexuqiong

chymanhz 发表于 2015-8-21 17:09
是做细胞毒实验？加了抗体细胞不是都死了

老师，我们老大是说看细胞活性，但实际上应该是看培养的细胞里NK 细胞所占比例吧。我也不是很清楚。。

chymanhz

xuexuqiong 发表于 2015-8-21 17:27
老师，我们老大是说看细胞活性，但实际上应该是看培养的细胞里NK 细胞所占比例吧。我也不是很清楚。。 ...

nk比较就是那群1656+CD3-的，要是活性就用PI染色看看