破膜剂的秘密（一）

niwanmao

bernie1023 发表于 2016-6-8 16:58
如果不破膜，如何设立阳性对照呢？不太明白

我前面的意思是，预期的阳性对照。假如你用某种处理方式处理后，预期细胞内钙离子肯定增高，不应该出现阴性结果。

缺血再灌注损伤

老师好！请问下胞内染色时，固定打孔时间在什么范围呢？有人说固定打孔半小时，染色半小时足矣，还有说固定打孔一小时，染色一小时；还有说固定打孔四小时的。。。。请老师给点建议，谢谢！

缺血再灌注损伤

老师好！请问下胞内染色时，固定打孔时间在什么范围呢？有人说固定打孔半小时，染色半小时足矣，还有说固定打孔一小时，染色一小时；还有说固定打孔四小时的。。。。请老师给点建议，谢谢！

niwanmao

缺血再灌注损伤 发表于 2016-6-21 09:21
老师好！请问下胞内染色时，固定打孔时间在什么范围呢？有人说固定打孔半小时，染色半小时足矣，还有说固定 ...

这个不同配方的破膜剂最优时间不同，需要自己摸索最佳条件。

cocoa

老师，我用乙醇固定过夜后，用0.1%的triton，每管200微孵育5分钟，洗掉后孵育抗体，结果细胞都碎了，离不下来，不知道是什么原因

niwanmao

cocoa 发表于 2019-9-9 18:26
老师，我用乙醇固定过夜后，用0.1%的triton，每管200微孵育5分钟，洗掉后孵育抗体，结果细胞都碎了，离不下 ...

是Triton的缘故，不是乙醇的问题。我不知道你要做什么，我的建议是如果没有足够的经验，还是直接买商品化破膜剂。

cocoa

niwanmao 发表于 2019-9-9 21:02
是Triton的缘故，不是乙醇的问题。我不知道你要做什么，我的建议是如果没有足够的经验，还是直接买商品化 ...

做的胞内蛋白检测，我也觉得是triton的问题。。。

muyang

niwanmao 发表于 2019-9-9 21:02
是Triton的缘故，不是乙醇的问题。我不知道你要做什么，我的建议是如果没有足够的经验，还是直接买商品化 ...

倪老师，您好，准备流式测胞内细胞因子IL-10和IL-12，用Thermo的这个破膜盒子（GAS003
FIX & PERM™ Cell Permeabilization Kit）行不？

niwanmao

muyang 发表于 2019-9-10 16:34
倪老师，您好，准备流式测胞内细胞因子IL-10和IL-12，用Thermo的这个破膜盒子（GAS003
FIX & PERM™ Cell ...

可以的。如果感兴趣，我们的破膜剂也可以给你几个TEST试试。