人外周血T细胞亚型分析

hbezyr

niwanmao 发表于 2016-9-5 14:14
嗯，还真是，感谢分享。真的是学无止境。
例如下面这篇文章：

没有刺激过夜。那个标记方法在后续很多文献中就是这样子使用的。就是用了串联的染料。

niwanmao

hbezyr 发表于 2016-9-5 22:36
没有刺激过夜。那个标记方法在后续很多文献中就是这样子使用的。就是用了串联的染料。 ...

对，这篇文献里面没有刺激过夜，我是觉得那些过夜的话问题应该也不大。关键是避光。请问你做过染色后过夜的测试吗？

hbezyr

niwanmao 发表于 2016-9-5 22:44
对，这篇文献里面没有刺激过夜，我是觉得那些过夜的话问题应该也不大。关键是避光。请问你做过染色后过夜 ...

这个没有。
做过是染完色后，在固定液中过夜。

niwanmao

hbezyr 发表于 2016-9-6 15:29
这个没有。
做过是染完色后，在固定液中过夜。

效果如何？

bernie1023

之前特意做过PMA刺激前后CD4的表染，发现无论是分群还是阳性率，都没有差别。疑惑CD4内吞的说法，是对于某些实验或某些样本会这样？

niwanmao

bernie1023 发表于 2016-9-7 07:45
之前特意做过PMA刺激前后CD4的表染，发现无论是分群还是阳性率，都没有差别。疑惑CD4内吞的说法，是对于某 ...

哦，这倒有意思了。不知道你做的是人的淋巴细胞还是小鼠淋巴细胞？

bernie1023

niwanmao 发表于 2016-9-7 07:48
哦，这倒有意思了。不知道你做的是人的淋巴细胞还是小鼠淋巴细胞？

人的                                    

niwanmao

bernie1023 发表于 2016-9-7 07:50
人的

PMA通过钙离子的机制诱导CD4下调这是已经经过证实的：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2109010

只是为什么你的实验是这样的，我觉得是否需要考虑以下原因：
1、PMA刺激的效果？
2、CD4抗体的荧光强度略下调，但分群仍清楚，阳性率亦未改变？

hbezyr

bernie1023 发表于 2016-9-7 07:50
人的

你用的PMA和INO的浓度和厂家是？

bernie1023

niwanmao 发表于 2016-9-7 07:55
PMA通过钙离子的机制诱导CD4下调这是已经经过证实的：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2109010

只是 ...

嗯，从原理上来说是这样的。后续我再重复验证一下。最近实在太忙了，都没有时间做