同型对照荧光比抗体强，咋办？阻断！

niwanmao

五味瓶JJJ 发表于 2020-4-15 00:02
老师，文章链接出现错误，打不开啊

原文PDF链接吗？我刚刚测试了下，可以的呀。点击后就会自动下载PDF文件。

五味瓶JJJ

我刚试了一下，可以看啦

zjwgzy9

老师您好，我想问一下我准备做干细胞表面检测，代理商推的试剂盒每个抗体都含有同型对照，那我可以直接用FC block全部代替这些同型对照抗体吗

niwanmao

zjwgzy9 发表于 2020-5-14 13:05
老师您好，我想问一下我准备做干细胞表面检测，代理商推的试剂盒每个抗体都含有同型对照，那我可以直接用FC ...

那个试剂盒已经有比较完善的流程，建议参照试剂盒的流程做。

chunfeng

倪老师好。如果我只用同型抗体看背景值可以吗？比如对比一下荧光强度。是先加FC阻断剂封闭然后加抗体还是可以同时加呢？

闷油瓶

老师您好，我们测间充质，以前用的PE的同型对照一直很好，几乎没有什么荧光，但是后来图便宜，换了一种同型对照，结果上机一测，荧光很强，之前设的阳性门里用同型对照的话能达到90%多的细胞，这种情况该怎么办？是不是还得换回原来的同型？调模板应该不管用吧？

闷油瓶

老师您好，我们以前用的PE的同型对照测量值很低，后来换了一个牌子的同型对照，结果同型对照荧光非常强（用的直方图），在之前的阳性门里大概有90%左右（之前的阳性细胞大约99%作用），这是什么情况？为啥同型染上之后荧光这么强？

闷油瓶

niwanmao 发表于 2020-5-15 10:48
那个试剂盒已经有比较完善的流程，建议参照试剂盒的流程做。

为啥我回不了贴了

YC5125

老师您好，小鼠骨髓源的巨噬细胞（BMDM）或者腹腔源的巨噬细胞（PM）分型需要阻断剂吗？

niwanmao

YC5125 发表于 2021-12-20 15:14
老师您好，小鼠骨髓源的巨噬细胞（BMDM）或者腹腔源的巨噬细胞（PM）分型需要阻断剂吗？ ...

需要的。