再谈同型对照：是该放弃这过时的东西了

niwanmao

854133308 发表于 2018-11-13 11:00
用到的buffer是2%FBS的PBS，那这个有阻断作用吗

有

sunny2829

但是在实验过程中，我们还是经常用的，比如检测MSC的marker表达，胚胎干细胞是否表达C-peptide，都直接拿同型对照来比较样本是否高表达，低表达，不表达呀。
有时还在纠结同型对照画门的位置去分析marker低表达，还是不表达。

这种情况不用同型对照，应该怎么办呀？是否有更好的替代方法。

niwanmao

sunny2829 发表于 2018-11-15 11:18
但是在实验过程中，我们还是经常用的，比如检测MSC的marker表达，胚胎干细胞是否表达C-peptide，都直接拿同 ...

我觉得在顶楼里面上面讲的很清楚了吧。
Blocking

酷鼠儿

不知道是不是同型的选择有问题，有的时候同型会有两个峰

niwanmao

酷鼠儿 发表于 2019-1-15 16:42
不知道是不是同型的选择有问题，有的时候同型会有两个峰

如果是单色的话肯定有问题，多色的话可能是补偿。

archerliang

老师您好，之前我们做间充质干细胞pe，fitc双标，用鼠抗igg1做同型对照调补偿，如果不用同型对照的话如何做？

niwanmao

archerliang 发表于 2019-1-23 14:06
老师您好，之前我们做间充质干细胞pe，fitc双标，用鼠抗igg1做同型对照调补偿，如果不用同型对照的话如何做 ...

FITC和PE调补偿不是很简单？
间充质干细胞选一个或两个阳性标记，用FITC或PE荧光素，然后单染上机调补偿。同型对照本就不是用来调节补偿的。

tianyang

niwanmao 发表于 2019-1-24 08:14
FITC和PE调补偿不是很简单？
间充质干细胞选一个或两个阳性标记，用FITC或PE荧光素，然后单染上机调补偿 ...

老师，我想问下，这种情况下的单阳在没有补偿微球时要怎么做？是要自己做单阳，找一个确定表达的细胞（可以是非同种细胞），然后跟带荧光素的抗体结合？

niwanmao

tianyang 发表于 2020-6-8 10:00
老师，我想问下，这种情况下的单阳在没有补偿微球时要怎么做？是要自己做单阳，找一个确定表达的细胞（可 ...

如果找的到阳性细胞最好。实在找不到，只能用补偿微球来做。

szmraymond

niwanmao 发表于 2018-11-13 21:24
有

倪老师，我的staining buffer是1xPBS+1%BSA, BSA是不是就有阻断FC作用不用再加其他阻断剂了？