肿瘤浸润的treg检测

niwanmao

谱一首幸福 发表于 2017-12-27 16:20
你做的也是消肿瘤组织细胞吗？图我贴上来了，但是贴的是CD3CD8Ki67的图，都是核内抗原染色，两者都染不上 ...

正常淋巴细胞Ki67应该是低的，倒是FoxP3我觉得你可以拿出来看看。

谱一首幸福

chevalierx 发表于 2017-12-27 18:13
单纯看你给的图，我不能确定你有没有染上。（1）通常做核内染色，为了确定阳性群位置会做同型对照，你的 ...

是我们流式仪器的问题，测荧光时，control值都有这么高

chevalierx

谱一首幸福 发表于 2017-12-27 19:13
是我们流式仪器的问题，测荧光时，control值都有这么高

你上一张Foxp3的图吧，让倪老师帮你看下。我做过几次，foxp3的分群应该还是很明显的呀。

谱一首幸福

niwanmao 发表于 2017-12-27 18:50
正常淋巴细胞Ki67应该是低的，倒是FoxP3我觉得你可以拿出来看看。

倪老师，图已经换成foxp3的了，FL4通道是FOXP3，FL2通道是CD4，FL1是CD3，我感觉应该是没有染上

谱一首幸福

chevalierx 发表于 2017-12-27 19:23
你上一张Foxp3的图吧，让倪老师帮你看下。我做过几次，foxp3的分群应该还是很明显的呀。 ...

恩恩，刚刚换成foxp3的图，可以帮忙一起看看不，我觉得应该是没有染上的

chevalierx

谱一首幸福 发表于 2017-12-27 19:27
恩恩，刚刚换成foxp3的图，可以帮忙一起看看不，我觉得应该是没有染上的

你在没有gate的情况下，看下FL4的柱状图有没有阳性峰

谱一首幸福

chevalierx 发表于 2017-12-27 19:28
你在没有gate的情况下，看下FL4的柱状图有没有阳性峰

不圈门也几乎看不到双峰

chevalierx

谱一首幸福 发表于 2017-12-27 19:32
不圈门也几乎看不到双峰

建议你把你的所有处理细节，包括你上流式收集的细胞数之类的都写在贴子里，让有经验的人找找问题。

niwanmao

谱一首幸福 发表于 2017-12-27 19:32
不圈门也几乎看不到双峰

从CD3＋比例只有1％多的情况，结合FSC/SSC，貌似样本状态有问题，倒不一定就是抗体和破膜剂的问题。我的建议是用正常人外周血验证一下抗体和破膜剂，我个人感觉问题不大，而是样本处理后细胞死亡的问题。

谱一首幸福

niwanmao 发表于 2017-12-28 08:20
从CD3＋比例只有1％多的情况，结合FSC/SSC，貌似样本状态有问题，倒不一定就是抗体和破膜剂的问题。我的 ...

好的，谢谢倪老师，不过这种处理过程中细胞死亡的问题几乎是没法避免的