肿瘤浸润的treg检测

niwanmao

谱一首幸福 发表于 2017-12-28 08:43
好的，谢谢倪老师，不过这种处理过程中细胞死亡的问题几乎是没法避免的 ...

是的，无法避免，但是尽量减少，像这张图上这样，我觉得是死得太多了。
样本处理是用酶消化还是机械研磨？

谱一首幸福

niwanmao 发表于 2017-12-28 14:20
是的，无法避免，但是尽量减少，像这张图上这样，我觉得是死得太多了。
样本处理是用酶消化还是机械研磨 ...

我用的是酶消化（不知道是不是因为离心转速高的原因，我都是2500转，7min的，怕淋巴细胞离心不下来）

niwanmao

谱一首幸福 发表于 2017-12-28 16:19
我用的是酶消化（不知道是不是因为离心转速高的原因，我都是2500转，7min的，怕淋巴细胞离心不下来） ...

我们一般是500g，大约1000转左右。
酶消化、离心速度高，都有关系，因为肿瘤细胞到了外界还是很脆弱的。

谱一首幸福

niwanmao 发表于 2017-12-28 16:24
我们一般是500g，大约1000转左右。
酶消化、离心速度高，都有关系，因为肿瘤细胞到了外界还是很脆弱的。 ...

好的，我再试试，谢谢倪老师

whyxa

楼主还是用IL-2刺激一下PBMC，做个Treg的阳性对照吧