关于自动补偿和不同软件的补偿适配问题

wmj123456

niwanmao 发表于 2018-12-3 15:13
1、补偿微球设出的补偿，不适合细胞样本，因为两者的颗粒度不一样。要想让补偿能够直接适合样本，必须得样 ...

倪老师，做自动补偿的时候，仪器里的补偿实验，通常包括空白管和单染管，对于有些阴阳性分群不太明显的，是否可以直接参考空白管来画阴阳性的门？如果没有阴阳性设门的参考，仪器是客观来设门的，最后计算出来的补偿可能有偏差

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-5-4 13:25
倪老师，做自动补偿的时候，仪器里的补偿实验，通常包括空白管和单染管，对于有些阴阳性分群不太明显的， ...

空白管，一般只是确认电压是否合适，并不是用于设门参照的。

设门，要么选择内参阴性对照，要么做FMO或者生物学阴性对照。

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-5-4 13:41
空白管，一般只是确认电压是否合适，并不是用于设门参照的。

设门，要么选择内参阴性对照，要么做FMO或 ...

嗯，可能我理解的是，单染管设门就按照一个指标，不涉及多色的荧光遗漏，以及本底荧光，所以是不是也可以按照空白管来设单染管的阴阳性门了？我只是为了在做自动补偿的时候，每个单染管的门阴阳性设的更加精准些

悠游

wmj123456 发表于 2023-5-4 14:32
嗯，可能我理解的是，单染管设门就按照一个指标，不涉及多色的荧光遗漏，以及本底荧光，所以是不是也可以 ...

单阳管的话感觉可以，不过自动补偿应用于真正样本分析的时候，最好再看一下，可能需要微调

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-5-4 14:32
嗯，可能我理解的是，单染管设门就按照一个指标，不涉及多色的荧光遗漏，以及本底荧光，所以是不是也可以 ...

本底荧光，单染管有，空白管无法反映出来。
单染管虽然只染一个指标，是一般是要求阴性群和阳性群能够很好的分开，否则自动补偿比较难计算。

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-5-4 20:31
本底荧光，单染管有，空白管无法反映出来。
单染管虽然只染一个指标，是一般是要求阴性群和阳性群能够很 ...

倪老师，如果做自动补偿，指标是连续线表达，该如何画阴阳性的门，才会使自动补偿的结果更加准确些，这方面您有经验么？

把中间连续性的细胞归为阳性还是阴性，还是不圈呢？

niwanmao

wmj123456 发表于 2024-3-20 11:43
倪老师，如果做自动补偿，指标是连续线表达，该如何画阴阳性的门，才会使自动补偿的结果更加准确些，这方 ...

不建议用这种标记来做补偿，通常还是建议用相同荧光素的其它抗体来做（串联染料可能有批间差，但基本上还是可用的）

wmj123456

明白倪老师的意思了。对了，倪老师，本周的广州线下聚会，到时候来不及参加了，后续会有回放么？