细胞系fsc-ssc分为两个群

tiger

chunfeng 发表于 2020-10-26 22:05
谢谢您的答复。请问您说的PI“浓度降下来”是指PI 通道信号太高了吗，还是指PI实际浓度过高了？我用biole ...

PI浓度太高了，一般做凋亡PI浓度1-2ug/ml就可以了。你把数据传上来，这里有很多能人。

zhangxuzhen

左上那一群是坏死细胞，右边的细胞出现两群确实不正常，有没有可能是细胞污或者仪器状态不好之类？

chunfeng

tiger 发表于 2020-10-27 08:42
PI浓度太高了，一般做凋亡PI浓度1-2ug/ml就可以了。你把数据传上来，这里有很多能人。 ...

我是根据说明书加的量，可能细胞相对少了，浓度就相应高了。下次调整试试。谢谢了

chunfeng

zhangxuzhen 发表于 2020-10-27 11:32
左上那一群是坏死细胞，右边的细胞出现两群确实不正常，有没有可能是细胞污或者仪器状态不好之类？ ...

Q1象限是没问题的。我前面做的Q2没出现过这个情况，心里也拿不准。仪器应该没问题，前一天厂家刚来维护，之后就没人用过。我们实验室基本上只有我一个人用，我卡了QC track 都是好的。明天换代数小的细胞再跑一次试试。谢谢您的回复~

chunfeng

MUGUANGZHICHENG 发表于 2020-10-26 22:10
首先确保你的样本没有问题，我用台盼蓝计数确定活率，然后样本染死活染料，用细胞调的FSC和SSC。 ...

您好，不知我这么理解的对不对：台盼蓝先染色看细胞活性，再用PI或者7-AAD跑流式，和台盼蓝对比活性率。如果差不多那机器就没问题。 对吗？

chunfeng

niwanmao 发表于 2020-10-24 22:34
确保细胞状态没问题、处理也没问题的话，得排除仪器液流状态变异，每天的仪器质控有做吗？ ...

倪老师，我查了下资料，结合上面tiger战友说的，细胞里出现两个群理论上确实说得通。凋亡细胞体积减小，胞内颗粒度增加 反应在FSC-SSC图上应该就是比正常细胞FS小， SSC大。不知道这样对不对

chunfeng

zhangxuzhen 发表于 2020-10-27 11:32
左上那一群是坏死细胞，右边的细胞出现两群确实不正常，有没有可能是细胞污或者仪器状态不好之类？ ...

左上Q1应该是机械损伤细胞，坏死细胞是右上Q2