用磁珠分选法从PBMCs中成功分选出NK细胞，且纯度达到97%

yxyyjs

用过很多Miltenyi的LD柱，重复使用效果感觉不好，每次用新柱比较安全

大品咿呀哟

其实Miltenyi的这个吸附柱加磁珠用来分选那些比例数量很低的细胞还不错，但是不能大量使用就是使用成本的问题，我们实验室主要用Biotin抗体加Beads 用TIANGEN的磁力架 这样磁力架可以一直用 成本会下来

lalasa

Lydia 发表于 2021-2-3 13:36
吸附柱厂商说不建议重复使用，我之前也想过重复使用（想使用完后清洗干净并且高压一下下次用）。但是吸附 ...

我们实验室摸索了吸附柱回收的方法: 柱子用完之后，用无水乙醇冲洗几次，然后立刻放到烘箱中烘干，烘干后再放到铁盒中高压灭菌，随后再烘干，基本不会生锈，再通率也很高，重复使用没有什么问题。

Tips：
1.一定要用无水的而不是95%的，实验做完后立刻冲洗不要拖延，不然会生锈
2. 无水乙醇冲完先别高压灭菌，烘干后再高压灭菌（如果不需要无菌这一步可以省略）

lalasa

大品咿呀哟 发表于 2021-2-26 09:26
其实Miltenyi的这个吸附柱加磁珠用来分选那些比例数量很低的细胞还不错，但是不能大量使用就是使用成本的问 ...

TIANGEN的磁力架分选纯度能达到多少，还有beads用的是哪个厂家的，这位战友能否详细分享一下？

甄翔幼

请问您提出来的NK，扩增培养用的是什么培养基呢，方便说吗

niwanmao

甄翔幼 发表于 2021-6-21 20:33
请问您提出来的NK，扩增培养用的是什么培养基呢，方便说吗

可参考这篇文献：
Somanchi, S. S., Senyukov, V. V., Denman, C. J., & Lee, D. A. (2011). Expansion, purification, and functional assessment of human peripheral blood NK cells. JoVE (Journal of Visualized Experiments), (48), e2540-e2540.

主要是培养基中加入10％FBS和IL-2

甄翔幼

niwanmao 发表于 2021-6-22 07:54
可参考这篇文献：
Somanchi, S. S., Senyukov, V. V., Denman, C. J., & Lee, D. A. (2011). Expansion,  ...

多谢