胞内染色固定和破膜，是不是会使GFP失效？

niwanmao

huoyingying 发表于 2021-10-15 17:41
求问， anti-human Lineage Cocktail(CD3,CD14,CD16,CD19,CD20,CD56)表染后，再对细胞破膜，会导致该通道的 ...

不应该啊，是不是非特异性染色？

huoyingying

niwanmao 发表于 2021-10-15 21:08
不应该啊，是不是非特异性染色？

感谢老师的回复，也看过老师之前说的Fc阻断剂的帖子，有一条说人的细胞样本不阻断问题不大，而且因为要看的目标群属于中性粒细胞前体阶段，可能也会表达CD16，这种情况我应该加Fc阻断剂吗？

niwanmao

huoyingying 发表于 2021-10-15 21:49
感谢老师的回复，也看过老师之前说的Fc阻断剂的帖子，有一条说人的细胞样本不阻断问题不大，而且因为要看 ...

不用啊。我们平时免疫分型经常做的，CD16是晚幼粒附近开始表达，所以不知道你要检测哪个阶段。

huoyingying

niwanmao 发表于 2021-10-16 09:06
不用啊。我们平时免疫分型经常做的，CD16是晚幼粒附近开始表达，所以不知道你要检测哪个阶段。 ...

感觉阶段类似G-MDSC，所以可能会有CD16，那这种破膜后lineage的非特异性染色，我应该怎么处理呢？

niwanmao

huoyingying 发表于 2021-10-16 16:43
感觉阶段类似G-MDSC，所以可能会有CD16，那这种破膜后lineage的非特异性染色，我应该怎么处理呢？ ...

Lin预混抗体中的CD16要去掉。

huoyingying

niwanmao 发表于 2021-10-17 09:22
Lin预混抗体中的CD16要去掉。

感谢倪老师耐心指导，那我用lineage cocktail用一个不带CD16的？还需要加Fc阻断剂吗？

niwanmao

huoyingying 发表于 2021-10-17 16:14
感谢倪老师耐心指导，那我用lineage cocktail用一个不带CD16的？还需要加Fc阻断剂吗？ ...

想做的规范一些，加。

huoyingying

niwanmao 发表于 2021-10-18 09:34
想做的规范一些，加。

好的，感谢倪老师的耐心解答。