流式检测贴壁细胞胞内RNA的不同破膜方法评测

niwanmao

本文发表在Avicenna J Med Biotech 2014第一期，测评了6种破膜方法在检测贴壁细胞HeLa胞内18S rRNA的效果：

• saponin
• Triton X-100
• Tween-20
• NP40
• Proteinase K
• streptolysin O
  

同时还进行了protocol的优化。

不同破膜剂检测18S rRNA的结果

最后得出结论：很明显0.2％ Tween-20效果最好，不过作者也提到，好的实验结果不是单纯由破膜剂决定，还要看杂交探针的条件等。本方法还可用于其它胞内mRNA的检测。


来源：Avicenna J Med Biotech 2014; 6(1): 38-46 Assessment of Different Permeabilization Methods of Minimizing Damage to the Adherent Cells for Detection of Intracellular RNA by Flow Cytometry

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2014-2-18 20:59 上传

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，下载需要1颗流星（为什么？）

hbezyr

这个有点麻烦，贴壁细胞可以直接通过荧光显微镜下直接检测到的。如果应用到悬浮细胞，或许应用价值更高。

niwanmao

hbezyr 发表于 2014-2-21 16:00
这个有点麻烦，贴壁细胞可以直接通过荧光显微镜下直接检测到的。如果应用到悬浮细胞，或许应用价值更高。 ...

荧光显微镜只能定性，只能数为数不多的细胞，而流式细胞仪可以计数几千上万个细胞，统计更准确。而且贴壁细胞就比悬浮细胞多一个消化步骤，并不繁琐。