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楼主: 叶晶
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[标本处理] 血液染色之后应该先裂红还是应该先染7AAD

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发表于 2022-6-22 21:39:50 | 显示全部楼层
叶晶 发表于 2022-6-22 13:52
老师,我是按照这个配方来的,然后因为我用的不多,所以整体缩小了10倍配的

...

我们平时用的都是这个,你能否说一下你配制的具体用量,和最后用的时候是怎么用的?我感觉应该是你配制或使用的时候出了问题。
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 楼主| 发表于 2022-6-29 10:08:07 | 显示全部楼层
倪老师,当时是称取了8.02g氯化铵和0.84g碳酸氢钠和0.037g的EDTA二钠放到100ml的烧杯里,然后加屈臣氏的水90ml,搅拌至溶解,然后用氢氧化钠调PH到7.4,最后加屈臣氏的水到100ml。用之前先用屈臣氏的水稀释10倍,用的时候是100微升离心后的血沉淀加了1.9ml,避光孵育了10min,然后PBS洗了三遍上机检测的
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发表于 2022-6-29 19:52:57 | 显示全部楼层
叶晶 发表于 2022-6-29 10:08
倪老师,当时是称取了8.02g氯化铵和0.84g碳酸氢钠和0.037g的EDTA二钠放到100ml的烧杯里,然后加屈臣氏的水9 ...

EDTA二钠的量应该是0.37g。

顺序应该是先染抗体,15分钟后,再加2ml已事先稀释的1×红细胞裂解液作用10分钟,然后离心即可,不要再洗三遍,EDTA的量应该不太会影响细胞,我觉得应该是被你洗丢掉了。
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 楼主| 发表于 2022-6-30 15:21:59 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2022-6-29 19:52
EDTA二钠的量应该是0.37g。

顺序应该是先染抗体,15分钟后,再加2ml已事先稀释的1×红细胞裂解液作用10 ...

好的,谢谢倪老师,我再试一下,因为之前用BD的裂解液的时候,裂解之后我们都会洗一下再上机的,那我不洗看看
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