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如果把一条小鼠主动脉比作一段只有2cm 长、1mm 粗的“微型血管长城”,那么过去的研究者想看清城墙里到底有哪些“守军”,往往得拆三次墙、用三只小鼠,才能分别拿到内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞和白细胞——耗时、费力、还常因细胞量不足而“断更”。
2022年,哈佛医学院 Mark Feinberg 团队在《Atherosclerosis》发表的一篇方法学论文,给出了一次性拆墙、一网打尽的新攻略:
- 单只小鼠主动脉一次可收获约 100 000 个活细胞,其中 10 000 个可精准分成 4 大兵种;
- 免疫磁珠分选纯度全部 >90 %;
- 新创“内膜撕膜”法,10 秒 TRIzol 灌注即可把 内膜 与 中膜 的 RNA 完全分离,转录组差异基因一次抓到 10 033 个。
这里着重介绍一下大家最关键的小鼠主动脉的酶消化,文章的方法学部分和附件给出了详细的步骤:
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