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在临床上，经常会碰到单核细胞增多，无论是医生还是做形态的同事，都会感到非常为难，因为单核细胞反应性增多十分常见。此时的希望都寄托到流式上了，流式是否能够帮助鉴别这些单核细胞的性质呢？
Yin Xu等人在 Am J Clin Pathol 2005;124:799-806的一篇《Flow Cytometric Analysis of Monocytes as a Tool for Distinguishing Chronic Myelomonocytic Leukemia From Reactive Monocytosis》为我们提供了诊断思路。
慢性粒单核细胞白血病（CMML）是一种克隆性干细胞疾病，以骨髓增殖/增生异常为特点，其诊断需要外周血单核细胞>1000/ul，并存在髓系增生异常，如果增生异常不明显，则需要遗传学异常或排除其它造成单核细胞增多的原因。CMML中的遗传性克隆异常约20％~40％，对于那些没有遗传学异常的CMML，如果形态学上增生异常不明显，那么区分CMML和反应性单核细胞增多就成了难点。因此文章中作者比较了CMML患者、反应性单核细胞增多患者、正常人的骨髓标本。
什么是CD14中等表达的单核细胞CD14表达强度降低，往往意味着分化的偏幼稚，下图中就是正常人骨髓中CD14的表达，其中紫色细胞即为CD14中等表达的单核细胞。
正常人骨髓CD4、CD13、CD15、CD33、CD36、CD38、CD45、CD64、HLA-DR阳性，CD11b和CD14不均一表达（多数荧光强度高），CD16多阴性，CD2、CD5、CD7、CD56阴性。CD14中等强度表达的单核细胞比例4.2％~29％（平均11％±7％）。见下图。
反应性单核细胞增多患者骨髓骨髓中单核细胞比例在5％~14％（平均7.5％），在CD45/SSC散点图上的位置与正常骨髓单核细胞类似，20例中有11例存在异常表型，包括CD56表达，还有HLA-DR和CD13的表达降低。其中3例表现出2种或更多的表型 异常，例如CD56+/HLA-DR（部分阳性）、CD2+/HLA-DR（部分阳性）。CD14中等表达的单核细胞为1％~28％（平均12％±7％）。
CMML患者骨髓中单核细胞比例在5％~42％（平均18％），在FSC和SSC散点图上由于粒细胞颗粒减少所以会发生重叠，但在CD45/SSC散点图上还是能分开的。 在15例做了完整方案检测的CMML中，10例（67％）表现出2种或更多的免疫表型异常，而在反应性单核细胞增多患者中，20例只有3例出现2种或更多的表型异常。 CD56异常表达和髓系标记的表达降低这两个特点，对CMML是非常有特异性的，尽管其发生率只有40％（8例/20例）。 CMML中CD14中等表达的单核细胞比例在2.3％~42％（平均22％±10％），明显高于反应性单核细胞增高和正常骨髓。
下图为CMML患者的单核细胞，红色为我们圈出的异常部分
下表总结了反应性单核细胞增多和CMML中常见免疫表型异常特征
下图统计了正常人、反应性单核细胞增多患者、CMML患者三组中的CD14中等表达单核细胞比例
结论①单核细胞存在2种或更多免疫表型异常（例如CD56+、CD13强度改变、CD15强度改变、HLA-DR强度改变、CD2+等）；
②CD14中等表达的单核细胞占总数20％或更多。
采用这两条标准诊断CMML，敏感度67％，特异度100％。
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发表于 2015-5-21 20:57:55
发表于 2015-6-3 18:07:47